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प्रोटीन को एक्सटोप्रोटीन प्रतिक्रिया: समीकरण के संकेत और सूत्र

कई खाद्य उत्पादों की गुणात्मक संरचना स्थापित करने के लिए, प्रोटीन के लिए एक्सन्टोप्रोटीन प्रतिक्रिया का उपयोग किया जाता है। यौगिक में सुगंधित अमीनो एसिड की उपस्थिति अध्ययन के तहत नमूने में एक सकारात्मक रंग परिवर्तन देगी।

प्रोटीन क्या है

इसे एक प्रोटीन भी कहा जाता है, जो एक जीवित जीव के लिए एक निर्माण सामग्री है। प्रोटीन मांसपेशियों की मात्रा का समर्थन करते हैं, विभिन्न अंगों के घायल और मृत ऊतक संरचनाओं को पुनर्स्थापित करते हैं, चाहे बाल, त्वचा या स्नायुबंधन हो। उनकी भागीदारी के साथ, लाल रक्त कोशिकाओं का उत्पादन किया जाता है, कई हार्मोनों के सामान्य कामकाज और प्रतिरक्षा प्रणाली के कोशिकाओं को विनियमित किया जाता है।

यह एक जटिल अणु है, जो 6 * 10 3 डाल्टन से बड़े पैमाने के साथ पॉलीपेप्टाइड है। प्रोटीन संरचना अमीनो एसिड अवशेषों द्वारा बड़ी मात्रा में बनाई जाती है, पेप्टाइड बॉन्ड द्वारा जुड़ा हुआ है।

प्रोटीन की संरचना

निम्न आणविक पेप्टाइड्स की तुलना में इन पदार्थों की एक विशिष्ट विशेषता उनके विकसित स्थानिक त्रि-आयामी संरचना है, जो आकर्षण के विभिन्न स्तरों के प्रभाव से समर्थित है। प्रोटीन के पास चार-स्तरीय संरचना होती है उनमें से प्रत्येक के लिए, उनकी विशेषताओं निहित हैं।

उनके अणुओं की प्राथमिक संस्था का आधार एक अमीनो एसिड अनुक्रम होता है, जिसकी संरचना प्रोटीन पर एक्सटोप्रोटीन प्रतिक्रिया को पहचानती है। इस तरह की संरचना एक समय-समय पर पेप्टाइड बांड -एचएन-सीएच-सीओ-को दोहरा रही है, और चयनात्मक हिस्सा एमिनोकार्बैक्जिलिक एसिड में साइड चेन रेडिकल है। वे भविष्य में पूरे पदार्थ के गुणों को निर्धारित करते हैं।

प्राथमिक प्रोटीन संरचना को काफी मजबूत माना जाता है, यह पेप्टाइड बांडों में मजबूत सहसंयोजक बातचीत की उपस्थिति के कारण है। प्रारंभिक स्तर पर स्थापित चिन्हों के आधार पर बाद के स्तर का गठन होता है।

एक हेलिक्स में एमिनो एसिड अनुक्रम को घुमा देने के कारण माध्यमिक संरचना का गठन संभव है जिसमें हाइड्रोजन बंधन मोड़ के बीच स्थापित होते हैं।

अणु के संगठन के तृतीयक स्तर का गठन होता है, जब हेलिक्स का एक हिस्सा दूसरे टुकड़ों पर हाइड्रोजन, डिस्लाफ़ाइड, सहसंयोजक या आयनिक यौगिकों के साथ, उन दोनों के बीच सभी संभव बंधनों की उपस्थिति के साथ आरोपित किया जाता है। परिणामस्वरूप, संघों को ग्लोब्यूल्स के रूप में प्राप्त किया जाता है।

उन दोनों के बीच रासायनिक बांड के गठन के साथ तृतीयक संरचनाओं की स्थानिक व्यवस्था अणु की एक सीमित प्रजातियों या एक चतुष्कोणीय स्तर के गठन की ओर ले जाती है।

एमिनो एसिड

वे प्रोटीन के रासायनिक गुणों के लिए जिम्मेदार हैं। लगभग 20 मुख्य एमिनो एसिड होते हैं जो विभिन्न अनुक्रमों में पॉलीपेप्टाइड बनाते हैं। इसमें हाइड्रॉक्सीप्रोलिन और हाइड्रोक्सिलाइज़िन के रूप में दुर्लभ एमिनोकार्बैक्जिलिक एसिड भी शामिल हैं, जो मूल पेप्टाइड्स से प्राप्त होते हैं।

ज़ांटॉप्रोटीन प्रोटीन मान्यता प्रतिक्रिया की एक संकेत के रूप में, व्यक्तिगत अमीनो एसिड की उपस्थिति अभिकर्मकों के रंग में एक परिवर्तन देता है, जो उनकी संरचना में विशिष्ट संरचनाओं की उपस्थिति का सुझाव देती है।

जैसा कि यह निकला, ये सभी कार्बोक्जिलिक एसिड हैं, जिसमें एमिनो समूह के लिए हाइड्रोजन परमाणु का प्रतिस्थापन था।

अणु की संरचना का एक उदाहरण ग्लाइसीन (एचएनएच-एचसीएच-सीओओओएच) का संरचनात्मक सूत्र है जो कि सरलतम एमिनो एसिड है।

इस मामले में, सीए 2- कार्बोन हाइड्रोजन्स में से एक को अब बेंजीन की अंगूठी, एमिनो, सल्फोनिक, कार्बोक्सी समूह सहित लंबी कट्टरपंथी द्वारा प्रतिस्थापित किया जा सकता है।

एक्सटोप्रोटीन प्रतिक्रिया क्या मतलब है?

प्रोटीन का गुणात्मक विश्लेषण करने के लिए, विभिन्न तरीकों का इस्तेमाल किया जाता है। इसमें प्रतिक्रियाएं शामिल हैं:

  • वायलेट धुंधला होने के साथ Biuretovuyu;
  • Ninhydrino एक नीली बैंगनी समाधान बनाने के लिए;
  • लाल रंग की स्थापना के साथ फार्मलाडहाइड;
  • भूरे रंग के काले रंग की वर्षा के साथ फॉल्स

प्रत्येक विधि को पूरा करने में, प्रोटीन की मौजूदगी और उनके अणु में एक निश्चित कार्यात्मक समूह की उपस्थिति प्रदर्शित होती है।

प्रोटीन के लिए एक्सन्टोप्रोटीन प्रतिक्रिया है इसे मुल्डर का टूटना भी कहा जाता है यह प्रोटीन के लिए रंग प्रतिक्रियाओं को संदर्भित करता है जिसमें सुगन्धित और हेटोरोकेक्लिक अमीनो एसिड मौजूद हैं।

ऐसे नमूने की एक विशेषता है नाइट्रोजन चक्रीय अमीनो एसिड अवशेषों के एसिड के साथ नाइट्रेशन की प्रक्रिया, विशेष रूप से, नाइट्रो समूह को एक बेंजीन की अंगूठी में जोड़ा जाता है।

इस प्रक्रिया का नतीजा एक नाइट्रो यौगिक का गठन होता है जो उपजी है। यह एक्सटोप्रोटीन प्रतिक्रिया का मुख्य लक्षण है।

एमिनो एसिड क्या हैं

इस तरह के एक नमूने से सभी एमिनोकार्कबैक्सिलिक एसिड का पता नहीं लगाया जा सकता है। एक्संटोप्रोटीन प्रोटीन मान्यता प्रतिक्रिया की मुख्य विशेषता एमिनो एसिड अणु में एक बेंजीन की अंगूठी या हेटोरोसायक्ल की उपस्थिति है।

प्रोटीन अमीनो कार्बोक्जिलिक एसिड में, दो सुगन्धित एसिड प्रतिष्ठित होते हैं, जिसमें एक फेनिल ग्रुप (फेनिलएलनिन में) और एक हाइड्रोक्सिफेनील कट्टरपंथी (टाइरोसिन में) होता है।

ज़ांटेप्रोटीन प्रतिक्रिया का प्रयोग करना, एक हेरोर्काइक्लिक अमीनो एसिड ट्रिप्टोफैन को एक सुगंधित इंडोले न्यूक्लियस होने पर निर्धारित होता है। प्रोटीन में उपर्युक्त यौगिकों की उपस्थिति परीक्षण माध्यम के रंग में एक विशिष्ट परिवर्तन देता है।

क्या अभिकर्मकों का उपयोग किया जाता है

एक्सटोप्रोटीन प्रतिक्रिया करने के लिए, अंडे या वनस्पति प्रोटीन का 1% समाधान तैयार करना आवश्यक होगा।

आम तौर पर चिकन अंडे का इस्तेमाल किया जाता है, जो कि जर्दी से प्रोटीन को अलग करने के लिए टूट जाता है। समाधान प्राप्त करने के लिए, 1% प्रोटीन शुद्ध पानी की दस गुना मात्रा में पतला होता है। प्रोटीन भंग करने के बाद, परिणामी तरल को धुंध के कई परतों के माध्यम से फ़िल्टर्ड किया जाना चाहिए। यह समाधान एक शांत स्थान पर संग्रहीत किया जाना चाहिए।

वनस्पति प्रोटीन के साथ प्रतिक्रिया करना संभव है समाधान तैयार करने के लिए, गेहूं का आटा 0.04 किलोग्राम में प्रयोग किया जाता है। 0.16 ली शुद्ध पानी जोड़ें। यह सामग्री एक फ्लास्क में मिश्रित होती है, जिसे ठंडे स्थान पर 24 घंटे के लिए लगभग 1 डिग्री सेल्सियस तापमान के साथ रखा जाता है। एक दिन के बाद, समाधान हिल जाता है, जिसके बाद इसे पहले कपास ऊन के साथ फ़िल्टर्ड किया जाता है और फिर एक पेपर गुना फिल्टर के साथ। परिणामस्वरूप द्रव एक शांत जगह पर रखा जाता है। इस तरह के समाधान में, मुख्य रूप से एक अल्बुमिन अंश है।

एक्सटोप्रोटीन प्रतिक्रिया को पूरा करने के लिए, नाइट्रिक एसिड केंद्रित मुख्य अभिकर्मक के रूप में उपयोग किया जाता है। अतिरिक्त अभिकर्मक 10% सोडियम हाइड्रॉक्साइड या अमोनिया, एक जिलेटिन समाधान और एक बेहिचक फीनोल का समाधान है।

संचालन के तरीके

2 मिलीलीटर की मात्रा में अंडा या आटा प्रोटीन का 1% समाधान एक साफ परीक्षण ट्यूब में जोड़ा जाता है। केंद्रित नाइट्रिक एसिड के करीब 9 बूंदों को इसमें जोड़ा जाता है, ताकि फ्लोकेलिलेशन बंद हो। परिणामस्वरूप मिश्रण गर्म हो जाता है, जिसके परिणामस्वरूप एक पीला वेग और धीरे-धीरे गायब हो जाता है, और इसका रंग एक समाधान में बदल जाता है

जब तरल शांत हो जाता है, तो स्टोनोच्का द्वारा ट्यूब में लगभग 9 बूंदों को सोडियम हाइड्रोक्साइड जोड़ दिया जाता है, जो प्रक्रिया के लिए अधिक है। माध्यम की प्रतिक्रिया क्षारीय हो जाती है परीक्षण ट्यूब में सामग्री रंग में नारंगी हो जाती है।

की विशेषताएं

चूंकि एक्सटोप्रोटीन को नाइट्रिक एसिड की कार्रवाई के तहत प्रोटीन के लिए गुणात्मक प्रतिक्रिया कहा जाता है, इसलिए नमूना संलग्न हुड के नीचे लिया जाता है केंद्रित कस्तूरी पदार्थों को संभालने पर सभी सुरक्षा सावधानी बरतें।

हीटिंग प्रक्रिया के दौरान, सामग्री को ट्यूब से निकाल दिया जा सकता है, जिसे धारक को जोड़ने और ढलान का चयन करते समय इसे ध्यान में रखा जाना चाहिए।

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फिनोल के साथ तुलनात्मक प्रतिक्रिया

प्रक्रिया की स्पष्टता और एक फेनिल समूह की उपस्थिति की पुष्टि के लिए, हाइड्रॉक्सिबेंजेन के साथ एक समान परीक्षण किया जाता है।

एक टेस्ट ट्यूब में, 2 मिलीलीटर फिनोल पतला हो जाए, फिर धीरे-धीरे, स्टेनोचके द्वारा, 2 एमएल एसिड नाइट्रिक केंद्रित करें। समाधान हीटिंग के अधीन होता है, जिससे यह पीला हो जाता है। यह प्रतिक्रिया बेंजीन की अंगूठी की उपस्थिति के लिए गुणात्मक है

नाइट्रिक एसिड के साथ हाइड्रोक्सिबेंजेन के नाइट्रेशन की प्रक्रिया के साथ पैरानीट्रोफेनोल और ऑथोथिपिनाल का मिश्रण 15 से 35 अनुपात के अनुपात में होता है।

जिलेटिन के साथ तुलनात्मक परीक्षण

यह साबित करने के लिए कि प्रोटीन के लिए एक्सन्टोप्रोटीन प्रतिक्रिया अमीनो एसिड को केवल सुगन्धित संरचना से पता चलता है, प्रोटीन जिनके पास कोई फीनोलिक समूह नहीं होता है

एक साफ परीक्षण ट्यूब में 2 मिलीलीटर की मात्रा में एक 1% जिलेटिन समाधान जोड़ा जाता है। केंद्रित नाइट्रिक एसिड के लगभग 9 बूंदों को इसमें जोड़ा जाता है। परिणामस्वरूप मिश्रण गरम किया गया। यह समाधान रंगीन पीला नहीं है, जो एक खुशबूदार संरचना के साथ अमीनो एसिड की अनुपस्थिति को साबित करता है। कभी-कभी प्रोटीन की अशुद्धता की उपस्थिति के कारण, मध्यम का थोड़ा सा पीला होता है।

रासायनिक समीकरण

प्रोटीन को एक्सन्टोप्रोटीन प्रतिक्रिया दो चरणों में होती है पहले चरण का सूत्र एक नाइट्रोजन एसिड के साथ एक एमिनो एसिड अणु के नाइट्रेशन की प्रक्रिया का वर्णन करता है।

उदाहरण एक नाइट्रो ग्रुप को नाइट्रोटोसाइन और डायनेत्रोथोसिन के गठन के साथ टायरोसिन में जोड़ता है। पहले मामले में, कोई भी 2- बेंजेन बेंजीन की अंगूठी से जुड़ा हुआ है, और दूसरे यौगिक में पहले से ही दो हाइड्रोजन परमाणुओं को 2 से बदल दिया जाता है। नाइट्रोटोसाइन अणु के गठन के साथ नाइट्रिक एसिड के साथ एक्सरोटोप्रोटीन प्रतिक्रिया के रासायनिक सूत्र का प्रतिनिधित्व किया जाता है।

नाइट्रेशन प्रक्रिया के साथ एक पीले स्वर में रंगहीन रंगण के संक्रमण के साथ होता है जब यह प्रतिक्रिया ट्रिपोफान या फेनिलएलनिन के एमिनो एसिड अवशेष युक्त प्रोटीन से होती है, तो समाधान का रंग भी बदलता है।

दूसरे चरण में, विशेष रूप से नाइट्रॉरिओज़िन में टाइरोसिन अणु के नाइट्रेशन उत्पाद, अमोनियम या सोडियम हाइड्रोक्साइड के साथ बातचीत करते हैं। परिणाम एक सोडियम या अमोनियम नमक है, जिसमें रंग पीला-नारंगी है। इस तरह की प्रतिक्रिया एक क्विनिन रूप में पारित करने के लिए नाइट्रॉथोरोसिन के अणु की संभावना के साथ जुड़ा हुआ है। बाद में यह नाइट्रॉनिक एसिड का नमक बनाता है, जिसमें क्वाइनोन सिस्टम डबल संयुग्मित बॉन्ड की है।

इस प्रकार, प्रोटीन को एक्सन्टोप्रोटीन प्रतिक्रिया समाप्त होती है दूसरे चरण का समीकरण ऊपर प्रस्तुत किया गया है।

परिणाम

तीन टेस्ट ट्यूबों में निहित तरल पदार्थ के विश्लेषण की प्रक्रिया में, कमजोर पड़ने वाले फिनोल संदर्भ समाधान के रूप में कार्य करता है। बेंजीन की अंगूठी वाले पदार्थ नाइट्रिक एसिड के साथ गुणात्मक प्रतिक्रिया देते हैं। नतीजतन, समाधान का रंग बदलता है

जैसा कि ज्ञात है, जिलेटिन को एक हाइड्रोलाइज्ड रूप में कोलेजन शामिल है। इस प्रोटीन में सुगन्धित संरचना के एमिनोकार्बैक्जिलिक एसिड नहीं होते हैं। जब एसिड के साथ बातचीत करते हैं, तो मध्यम का रंग बदलता नहीं है।

तीसरी टेस्ट ट्यूब में, प्रोटीन के लिए एक सकारात्मक एक्संटोप्रोटीन प्रतिक्रिया देखी जाती है। निष्कर्ष निम्नलिखित किया जा सकता है: एक खुशबूदार संरचना के साथ सभी प्रोटीन, यह एक phenyl समूह या एक इंडोल अंगूठी हो, समाधान का एक रंग परिवर्तन दे। यह पीले रंग के साथ नाइट्रो यौगिकों के गठन के कारण है।

रंग की प्रतिक्रिया का आयोजन अमीनो एसिड और प्रोटीन में विविध रासायनिक संरचना की उपस्थिति को साबित करता है। जिलेटिन के साथ एक उदाहरण से पता चलता है कि इसमें एमिनोकार्बैक्जिलिक एसिड होते हैं जिनमें फ़िनिल समूह या चक्रीय संरचना नहीं होती है।

ज़ांटेप्रोटीन प्रतिक्रिया का प्रयोग करना, जब त्वचा पर नाइट्रिक एसिड लगाया जाता है, त्वचा की पीली को समझाना संभव है। इसके साथ इसी तरह के विश्लेषण करते समय दूध के फोम द्वारा एक ही रंग का अधिग्रहण किया जाएगा।

चिकित्सा प्रयोगशाला अभ्यास में, यह रंग नमूना मूत्र में प्रोटीन का पता लगाने के लिए उपयोग नहीं किया जाता है। यह मूत्र के स्वयं के पीले रंग के कारण होता है।

एक्सटोप्रोटीन प्रतिक्रिया का उपयोग मात्रा प्रोटीन में मात्रात्मक रूप से एमिनो एसिड, जैसे ट्रिप्टोफैन और टाइरोसिन, को गिनने के लिए किया जाता है।

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